Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO galectin-4 (h): sc-404255
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- galectin-4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique galectin-4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: galectin-4 Antibody (D-11): sc-376398
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO galectin-4 (h) | sc-404255 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
LGALS4 code la galectine-4, une lectine se liant aux β-galactosides, particulièrement abondante dans les épithéliums gastro-intestinaux, qui contribue à l’organisation de la membrane apicale et à l’homéostasie de la barrière muqueuse. La galectine-4 interagit avec des récepteurs glycosylés et des composants de la matrice extracellulaire afin de réguler l’adhésion cellule–cellule et cellule–matrice, la polarité épithéliale et la différenciation. Par des interactions dépendantes des glycannes, elle peut moduler des nœuds de signalisation liés à l’inflammation et au remodelage épithélial, notamment des voies coordonnant la dynamique de l’adhésion et les réponses aux cytokines. Une expression dérégulée de LGALS4 a été associée à des états inflammatoires intestinaux et à des néoplasies épithéliales, ce qui appuie son utilisation comme marqueur fonctionnel dans les études sur l’altération de la barrière et la biologie tumorale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO galectin-4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène LGALS4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du LGALS4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert LGALS4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine galectin-4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en LGALS4 pour l'étude de la signalisation de galectin-4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de LGALS4 essentiels à la fonction de galectin-4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de LGALS4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le galectin-4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le galectin-4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus LGALS4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le galectin-4 plasmide HDR (h) et le galectin-4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie LGALS4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles LGALS4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.