Plasmide Double Nickase (m) G530011O06Rik: sc-437289-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) G530011O06Rik correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide G530011O06Rik Double Nickase (m) et le plasmide G530011O06Rik Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant G530011O06Rik. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) G530011O06Rik | sc-437289-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) G530011O06Rik | sc-437289-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La souris G530011O06Rik code une protéine largement non caractérisée, avec une annotation fonctionnelle limitée, ce qui en fait une cible pertinente pour une exploration systématique de la fonction des gènes. Les profils d’expression et les caractéristiques prédites suggèrent des rôles potentiels dans des processus cellulaires fondamentaux tels que la régulation de l’expression génique, le métabolisme de l’ARN ou l’homéostasie protéique, même si son intégration définitive dans une voie reste à établir. La perturbation de loci peu annotés comme G530011O06Rik peut révéler des phénotypes dépendants du contexte, liés au contrôle du cycle cellulaire, aux réponses au stress ou à la spécification de lignée. Ainsi, G530011O06Rik est pertinent pour des études exploratoires visant à relier le génotype à des phénotypes moléculaires et cellulaires dans des modèles proches de la maladie, sans présupposer un mécanisme précis.
G530011O06Rik Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus G530011O06Rik dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de G530011O06Rik. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de G530011O06Rik. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de G530011O06Rik.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.