Plasmide Double Nickase (h) FXYD2: sc-404044-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FXYD2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FXYD2 Double Nickase (h) et le plasmide FXYD2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FXYD2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FXYD2 | sc-404044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FXYD2 | sc-404044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FXYD2 code une petite protéine membranaire à passage unique qui sert de sous-unité régulatrice spécifique des tissus de la Na⁺/K⁺-ATPase, en modulant la cinétique de la pompe et l’homéostasie ionique. Dans le rein humain et d’autres épithéliums, FXYD2 contribue à la gestion transépithéliale du sodium et à l’équilibre osmotique cellulaire, ce qui le relie à des processus plus larges tels que la régulation du potentiel de membrane et le transport des électrolytes. Une expression ou une fonction altérée de FXYD2 a été associée à la physiologie des tubules rénaux et à des phénotypes héréditaires de maladies tubulo-interstitielles, et a également été étudiée dans des contextes de réponses au stress métabolique. Étant donné que l’activité de la Na⁺/K⁺-ATPase influence la signalisation en aval et l’énergétique cellulaire, FXYD2 constitue une cible pertinente pour l’étude des voies dépendantes du transport ionique en biologie épithéliale.
FXYD2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FXYD2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FXYD2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FXYD2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FXYD2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.