FRP-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422898

개요

Frzb는 FRP-3(분비형 frizzled-related protein 3로도 알려짐)을 암호화하며, FRP-3는 Wnt 리간드에 결합해 Frizzled 수용체의 활성화를 약화시킬 수 있는 세포외 Wnt 신호 조절자입니다. FRP-3는 정준(캐노니컬) β-카테닌 의존적 전사와 비정준(non-canonical) Wnt 경로를 조율함으로써, 배아 패터닝, 조직 형태형성, 그리고 골·연골 항상성을 포함한 간엽계 계통 분화의 조절에 기여합니다. 마우스 모델에서 FRP-3 활성의 변화는 골 형성 역학과 세포외기질 재형성의 변화와 연관되어 왔으며, 이러한 과정은 발달 이상 및 퇴행성 표현형과 자주 연결됩니다. Wnt 신호는 세포 운명 결정과 증식 조절과 긴밀히 연동되어 있으므로, Frzb는 경로 불균형이 염증 관련 조직 재형성과 종양 생물학에 기여하는 맥락에서 널리 연구됩니다.

FRP-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Frzb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Frzb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Frzb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FRP-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FRP-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Frzb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FRP-3 기능에 중요한 Frzb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Frzb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FRP-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FRP-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Frzb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FRP-3 HDR 플라스미드 (m) 및 FRP-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Frzb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Frzb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.