FRP-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422897

개요

Sfrp1은 분비형 프리즐드 관련 단백질 1(FRP-1)을 암호화하며, FRP-1은 Wnt 리간드와 Frizzled 수용체에 결합해 신호 경로의 강도와 공간적 기울기를 형성하는 Wnt 신호전달의 분비성 조절 인자입니다. FRP-1은 정준(캐노니컬) β-카테닌 의존성 전사와 비정준(논-캐노니컬) Wnt 출력 신호를 조율함으로써, 발생 및 조직 항상성 과정에서 세포 증식, 분화, 이동, 세포외기질 리모델링에 영향을 줍니다. 마우스 모델과 기전 연구에서 Sfrp1 활성의 변화는 섬유화, 대사 및 골격 관련 표현형, 그리고 종양 연관 신호전달 환경과 관련된 Wnt 경로 상태의 이상 조절과 연관되어 왔습니다. Sfrp1은 세포외 인터페이스에서 기능하기 때문에, Wnt 구동 프로그램에서 자가분비(autocrine)와 측분비(paracrine) 조절을 구분해 분석하는 데 자주 활용됩니다.

FRP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sfrp1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sfrp1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sfrp1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FRP-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FRP-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sfrp1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FRP-1 기능에 중요한 Sfrp1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sfrp1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FRP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 FRP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sfrp1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FRP-1 HDR 플라스미드 (m) 및 FRP-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sfrp1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sfrp1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.