Plasmide Double Nickase (h) FGF-4: sc-403042-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FGF-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FGF-4 Double Nickase (h) et le plasmide FGF-4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FGF4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FGF-4 Antibody (19805.11): sc-57126
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FGF-4 | sc-403042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FGF-4 | sc-403042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF4 code le facteur de croissance des fibroblastes 4 (FGF-4), un ligand sécrété se liant à l’héparine, qui transmet ses signaux principalement via les récepteurs tyrosine kinases de la famille FGFR afin de réguler la mise en place des patrons embryonnaires, le développement des membres et la morphogenèse tissulaire. La liaison de FGF-4 active en aval les cascades de signalisation RAS–MAPK/ERK, PI3K–AKT et PLCγ, qui coordonnent la prolifération, la survie, la migration et la différenciation dans les types cellulaires répondants. Une signalisation FGF4 dérégulée a été impliquée dans des anomalies du contrôle de la croissance et des programmes de développement altérés, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’activation de voies oncogéniques, du comportement des cellules souches/progénitrices et de la communication tumeur–stroma. Dans le cadre plus large de l’axe FGF–FGFR, FGF-4 est fréquemment étudié pour ses effets sur la dynamique épithélio-mésenchymateuse et la signalisation du microenvironnement.
FGF-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FGF4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FGF4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FGF4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FGF4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.