FEZF2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406571

Descripción general

FEZF2 (factor 2 de dedos de zinc de la familia FEZ) codifica un factor de transcripción con dominios de dedos de zinc tipo C2H2 que actúa como un regulador clave del desarrollo del prosencéfalo y de la especificación de subtipos neuronales. En el neurodesarrollo humano, FEZF2 influye en la corticogénesis al dirigir el destino de las neuronas de proyección corticotalámicas y coordinar programas transcripcionales vinculados a la guía axonal, la migración neuronal y el patrón regional. A través de su papel en redes génicas definidoras de linaje, FEZF2 contribuye al establecimiento de los circuitos corticales y de la conectividad sináptica. La desregulación o la variación genética en vías reguladoras asociadas a FEZF2 se ha investigado en el contexto de fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos del desarrollo cerebral y de la identidad neuronal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FEZF2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FEZF2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FEZF2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FEZF2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FEZF2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FEZF2 para la investigación de la señalización de FEZF2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FEZF2 críticos para la función de FEZF2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FEZF2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FEZF2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FEZF2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FEZF2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FEZF2 (h) y el plásmido HDR FEZF2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FEZF2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FEZF2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.