ferritin heavy chain CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-418152

개요

FTH1은 페리틴 복합체의 촉매 소단위로서 Fe2+를 Fe3+로 산화시켜 세포 내에서 철을 안전하게 저장할 수 있게 하는 페리틴 중쇄(heavy chain)를 암호화합니다. FTH1은 유리 철(labile iron)을 완충하고 철에 의해 유도되는 활성산소종(ROS) 형성을 제한함으로써 산화환원 항상성, 미토콘드리아 기능, 그리고 산화적 손상으로부터의 보호에 기여합니다. 페리틴의 동태는 트랜스페린 수용체 매개 엔도사이토시스와 페로포틴(ferroportin) 의존적 유출을 포함한 철 유입 및 수출 경로와 교차하며, 저산소증, 염증, 대사 스트레스에 대한 세포 반응을 형성합니다. FTH1 발현 또는 페리틴 대사의 이상은 철 과부하, 신경퇴행, 감염 연관 염증, 그리고 철 이용 가능성이 증식 및 세포사멸 프로그램에 영향을 미치는 종양 생물학 등의 맥락에서 빈번히 연구됩니다.

ferritin heavy chain CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FTH1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FTH1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FTH1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ferritin heavy chain 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ferritin heavy chain 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FTH1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ferritin heavy chain 기능에 중요한 FTH1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FTH1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ferritin heavy chain CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ferritin heavy chain CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FTH1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ferritin heavy chain HDR 플라스미드 (h) 및 ferritin heavy chain HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FTH1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FTH1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.