FBXO3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425412

概要

Fbxo3はマウスにおいてF-boxタンパク質FBXO3をコードしており、ユビキチン依存的なタンパク質分解回転を介してプロテオスタシスの制御に寄与するSCF（SKP1–CUL1–RBX1）E3ユビキチンリガーゼ複合体の基質認識サブユニットである。選択的なユビキチン化を誘導することで、FBXO3は細胞内シグナル伝達のダイナミクス、細胞周期およびストレス応答プログラム、ならびに経路調節因子の安定性に影響を与える。SCF–F-boxネットワークにおける活性の変化は、炎症の制御異常やより広範な免疫シグナル伝達の乱れ、さらには疾患生物学に関わる細胞恒常性の変化と関連づけられている。これらの特性により、Fbxo3はユビキチン–プロテアソーム経路によるシグナル伝達と表現型の制御を研究するうえで有用な結節点となる。

FBXO3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFbxo3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fbxo3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fbxo3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FBXO3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FBXO3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fbxo3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FBXO3の機能に不可欠なFbxo3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fbxo3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FBXO3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFBXO3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fbxo3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FBXO3 HDRプラスミド（m）および FBXO3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFbxo3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFbxo3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。