FBL10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403232
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FBL10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FBL10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FBL10 Anticorpo (5G1): sc-293279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FBL10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403232 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KDM2B codifica a proteína humana FBL10, uma desmetilase de lisina de histonas com domínio JmjC que reconhece DNA rico em CpG por meio do seu dedo de zinco CxxC e modula a acessibilidade da cromatina. A FBL10 participa da repressão transcricional associada ao Polycomb e ajuda a coordenar programas epigenéticos que controlam a progressão do ciclo celular, o comprometimento de linhagem e a manutenção da identidade celular. Por meio da regulação dos estados de metilação de histonas e da atividade de promotores e intensificadores (enhancers), a KDM2B influencia vias que governam proliferação e diferenciação. A atividade desregulada de KDM2B e o direcionamento alterado à cromatina têm sido associados a estados transcricionais oncogênicos e a fenótipos aberrantes semelhantes a células-tronco em diversos contextos de câncer e hematopoiese, tornando esse locus útil para estudos mecanísticos do controle epigenético.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FBL10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KDM2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KDM2B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KDM2B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FBL10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KDM2B para a investigação da sinalização de FBL10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KDM2B críticos para a função FBL10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KDM2B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FBL10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FBL10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KDM2B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FBL10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FBL10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KDM2B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KDM2B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.