Plasmide Double Nickase (h) FAT2: sc-402931-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FAT2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FAT2 Double Nickase (h) et le plasmide FAT2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FAT2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FAT2 Antibody (8C5): sc-59985
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FAT2 | sc-402931-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FAT2 | sc-402931-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAT2 code une protéine transmembranaire atypique de type cadhérine appartenant à la famille des protocadhérines FAT, qui contribue à l’adhésion cellule–cellule et à l’organisation de l’architecture épithéliale. Grâce à ses larges répétitions extracellulaires de cadhérines et à sa capacité de signalisation intracellulaire, FAT2 est associée à la régulation de la dynamique du cytosquelette et à des processus liés à la polarité planaire, qui influencent la forme cellulaire, la migration et la morphogenèse des tissus. Des altérations de la fonction de la famille FAT ont été associées à une perturbation des états de polarité et d’adhésion, susceptible d’affecter les programmes de différenciation ainsi que l’équilibre entre prolifération et inhibition de contact. FAT2 a été étudiée dans le contexte de la biologie des cancers et de la régulation du développement, où les modifications des signaux d’adhésion et des réseaux de polarité sont pertinentes pour les mécanismes pathologiques.
FAT2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FAT2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FAT2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FAT2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FAT2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.