Plásmido Doble Nickase (h) FANCA: sc-403205-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FANCA consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FANCA (h) y el plásmido de doble nickasa FANCA (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FANCA. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FANCA | sc-403205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FANCA | sc-403205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FANCA codifica un componente central de la vía de reparación del ADN de la anemia de Fanconi (FA), que protege la integridad del genoma durante el estrés replicativo al promover la reparación de los entrecruzamientos interhebra del ADN. FANCA participa en el complejo central de la FA, que permite la monoubiquitinación de FANCD2 y FANCI, coordinando el procesamiento nucleolítico posterior, la recombinación homóloga y la protección de la horquilla de replicación. La alteración de FANCA deteriora el control de los puntos de control y aumenta la rotura cromosómica y la formación de micronúcleos, especialmente tras la exposición a daño por agentes entrecruzantes. Las variantes patogénicas en FANCA son una causa principal de la anemia de Fanconi y también son relevantes para estudios sobre la biología del fallo de médula ósea y las vulnerabilidades de la respuesta al daño del ADN en modelos de cáncer.
FANCA El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FANCA en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FANCA. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FANCA. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FANCA alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.