Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Exportin 5: sc-403402-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Exportin 5 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Exportin 5 (h) y el plásmido de doble nickasa Exportin 5 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a XPO5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Exportin 5 Anticuerpo (A-11): sc-271036
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Exportin 5 | sc-403402-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Exportin 5 | sc-403402-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XPO5 codifica Exportina 5, un receptor de exportación nuclear dependiente de RanGTP que transporta pre-miARN y otros ARN estructurados desde el núcleo al citoplasma, permitiendo el procesamiento por Dicer y la biogénesis de microARN maduros. Al controlar la disponibilidad de precursores de miARN, Exportina 5 influye en programas de regulación génica postranscripcional vinculados al control del ciclo celular, la diferenciación y las respuestas al estrés. La función de XPO5 se integra con las vías de interferencia de ARN y con procesos más amplios de transporte nucleocitoplasmático coordinados por el sistema Ran. La desregulación de la exportación dependiente de XPO5 se ha asociado con perfiles de miARN alterados observados en múltiples contextos relevantes para enfermedades, lo que respalda su estudio en los mecanismos de control de la expresión génica.
Exportin 5 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus XPO5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de XPO5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de XPO5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con XPO5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.