ERMAP Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424173-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERMAPO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ERMAP (m) e o Plasmídeo Double Nickase ERMAP (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ermap. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERMAP Anticorpo (YS-6): sc-81790
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERMAP Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424173-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ermap codifica a proteína associada à membrana de eritroblastos (ERMAP), uma glicoproteína de membrana da superfamília das imunoglobulinas, enriquecida em células da linhagem eritroide. Em camundongos, a ERMAP contribui para a organização da membrana dos eritrócitos e participa de processos de reconhecimento célula–célula por meio de seus domínios extracelulares do tipo Ig, sustentando a maturação eritroide e a homeostase das hemácias. A ERMAP está ligada à biologia de antígenos de grupos sanguíneos e é usada como marcador para estudar a eritropoiese, a estabilidade de membrana e interações mediadas pelo sistema imune em tecidos hematopoéticos. A desregulação de proteínas da membrana eritroide, incluindo complexos associados à ERMAP, é relevante em modelos de anemia e de alteração na adesão ou depuração das hemácias.
ERMAP O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ermap em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ermap. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ermap. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ermap interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.