Plasmide Double Nickase (h) Endoglin/CD105: sc-400599-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Endoglin/CD105 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Endoglin/CD105 Double Nickase (h) et le plasmide Endoglin/CD105 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ENG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Endoglin/CD105 Antibody (P3D1): sc-18838
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Endoglin/CD105 | sc-400599-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Endoglin/CD105 | sc-400599-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ENG code l’endogline (CD105), un co-récepteur transmembranaire des ligands de la superfamille du TGF-β, qui module l’équilibre de signalisation ALK1/ALK5 et la transcription en aval dépendante des SMAD. L’endogline est fortement exprimée à la surface des cellules endothéliales proliférantes et participe à la régulation de l’angiogenèse, du remodelage vasculaire, de la dynamique de la matrice extracellulaire et de la transition endothélio-mésenchymateuse. Par ses interactions avec TGFBR2, ACVRL1 et les complexes de signalisation associés, CD105 influence les programmes d’adhésion et de migration cellulaires qui conditionnent l’intégrité des vaisseaux. Une dysrégulation de la fonction d’ENG est associée à une pathobiologie vasculaire, notamment la télangiectasie hémorragique héréditaire et les microenvironnements angiogéniques liés aux tumeurs, ce qui en fait une cible majeure pour les études mécanistiques en biologie endothéliale.
Endoglin/CD105 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ENG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ENG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ENG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ENG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.