eIF2Bδ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420143

개요

Eif2b4는 eIF2-GDP를 eIF2-GTP로 다시 충전해 번역 개시를 조절하는 구아닌 뉴클레오타이드 교환 인자인 eIF2B의 δ 소단위를 암호화한다. eIF2B는 삼자 복합체(ternary complex)의 가용성을 조절함으로써 통합 스트레스 반응(integrated stress response) 내에서 영양 상태와 스트레스 신호를 통합하며, eIF2α 인산화에 의존하는 단백질 합성 조절과도 교차한다. eIF2B 활성은 단백질 항상성(proteostasis), 세포 성장, 그리고 ER 스트레스 및 산화 스트레스와 연관된 적응성 전사 프로그램에 영향을 미친다. eIF2B 소단위의 기능 이상은 저수초화 백질이영양증(hypomyelinating leukodystrophy) 관련 경로와 연관되어 있어, Eif2b4는 신경 및 교세포 시스템에서 스트레스 민감적 번역 조절을 연구하는 데 중요한 표적이 된다.

eIF2Bδ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Eif2b4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Eif2b4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Eif2b4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 eIF2Bδ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 eIF2Bδ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Eif2b4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• eIF2Bδ 기능에 중요한 Eif2b4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Eif2b4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• eIF2Bδ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 eIF2Bδ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Eif2b4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  eIF2Bδ HDR 플라스미드 (m) 및 eIF2Bδ HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Eif2b4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Eif2b4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.