EDG-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420644

개요

Lpar1은 리소포스파티드산(LPA)을 인지하는 G 단백질 결합 수용체인 EDG-2를 암호화하며, 세포 밖의 지질 신호를 세포 이동, 증식, 생존, 그리고 세포골격 재구성을 조절하는 세포 내 프로그램으로 전달한다. EDG-2는 주로 Gαi/o, Gαq/11, Gα12/13 경로를 통해 PI3K–AKT, PLC–Ca2+ 신호전달, 그리고 RhoA/ROCK 매개 액틴 역동성을 활성화하여 부착과 수축성에 영향을 준다. 마우스 조직에서 Lpar1 신호는 화학주성과 장벽 기능 조절을 통해 신경발달 과정, 혈관 및 섬유아세포 반응, 면역세포 이동에 기여한다. LPA–EDG-2 활성의 이상 조절은 염증성 및 섬유화성 재형성과 연관되어 왔으며, 종양세포 운동성과 미세환경 간 상호작용에 관련된 기전에도 관여하는 것으로 시사되어, 경로 중심 질환 모델에서의 활용 가능성을 뒷받침한다.

EDG-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Lpar1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Lpar1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Lpar1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EDG-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EDG-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Lpar1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EDG-2 기능에 중요한 Lpar1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Lpar1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EDG-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 EDG-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Lpar1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EDG-2 HDR 플라스미드 (m) 및 EDG-2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Lpar1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Lpar1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.