Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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E-FABP Double Nickase Plasmid (h): sc-418529-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das E-FABP Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- E-FABP Double-Nickase-Plasmid (h) und E-FABP Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf FABP5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: E-FABP: sc-365236
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
E-FABP Double Nickase Plasmid (h) | sc-418529-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
E-FABP Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418529-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Fettsäurebindendes Protein 5 (FABP5), auch als epidermales FABP (E-FABP) bekannt, ist ein zytosolisches Lipid-Chaperon, das langkettige Fettsäuren und andere hydrophobe Liganden bindet, um den intrazellulären Transport, die Speicherung und die Nutzung zu koordinieren. Durch die Steuerung der Lipidverfügbarkeit beeinflusst E-FABP Membranumbau, oxidativen Stoffwechsel und lipidvermittelte Signalprogramme, einschließlich PPAR-regulierter Transkriptionsnetzwerke. Die Aktivität von FABP5 wurde mit zellulärer Differenzierung und Entzündungsreaktionen in Verbindung gebracht, was seine Rollen in der Epidermisbiologie und der Funktion von Immunzellen widerspiegelt. Eine fehlregulierte FABP5-Expression wird häufig im Zusammenhang mit metabolischer Reprogrammierung und veränderten Signalzuständen untersucht, wie sie in Krebs, Hauterkrankungen und Modellen entzündlicher Erkrankungen beobachtet werden.
E-FABP Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des FABP5-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von FABP5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die FABP5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit FABP5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.