Dynactin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406516

概要

DCTN6 はダイナクチン複合体の構成要素であるダイナクチン・サブユニット6をコードしており、細胞質ダイニンと協調して微小管依存的輸送を担います。ダイナクチンはダイニンを多様なカーゴに結び付け、細胞内輸送、小胞運動、ならびにオルガネラの配置や有糸分裂過程に影響する細胞骨格の組織化に寄与します。これらの役割を通じて、ダイナクチン6はエンドソーム‐リソソーム動態、中心体機能、細胞分裂の正確性を制御する経路に影響し得ます。ダイニン‐ダイナクチン依存的輸送の破綻は神経系および増殖に関わる表現型と関連付けられており、DCTN6 は細胞恒常性や輸送異常を伴う疾患機構の研究において重要です。

Dynactin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDCTN6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DCTN6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DCTN6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Dynactin 6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Dynactin 6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DCTN6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Dynactin 6の機能に不可欠なDCTN6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DCTN6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Dynactin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDynactin 6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DCTN6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Dynactin 6 HDRプラスミド（h）および Dynactin 6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDCTN6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDCTN6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。