DUSP22 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405867

Übersicht

DUSP22 kodiert eine Dual-Spezifitäts-Phosphatase, die Serin/Threonin- und Tyrosinreste dephosphoryliert und damit kinasegetriebene Signalnetzwerke moduliert. Es ist an der Regulation der Outputs des MAPK-Signalwegs sowie an der phosphoabhängigen Kontrolle der Signalübertragung von Immunrezeptoren beteiligt und beeinflusst dadurch Transkriptionsprogramme, Zellaktivierungszustände und Apoptose. Durch die Feinabstimmung der Phosphorylierungsdynamik trägt DUSP22 zur zellulären Homöostase in hämatopoetischen und anderen Geweben bei, in denen reizabhängige Signalgebung entscheidend ist. Eine veränderte DUSP22-Expression oder ein veränderter Signalwegkontext wurde mit dysregulierter Immunsignalgebung und onkogenen Prozessen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt in Studien zur signalgetriebenen Krankheitsbiologie unterstützt.

Das DUSP22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des DUSP22-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des DUSP22-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von DUSP22 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die DUSP22-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von DUSP22-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der DUSP22-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf DUSP22-Exone abzielen, die für die DUSP22-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere DUSP22-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom DUSP22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom DUSP22 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des DUSP22-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das DUSP22 HDR-Plasmid (h) und DUSP22 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von DUSP22-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten DUSP22-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.