DRAK2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404787

Übersicht

STK17B kodiert DRAK2, eine Serin/Threonin-Kinase aus der Familie der death-associated protein kinases, die die Signalantwortschwellen in Immunzellen moduliert. DRAK2 steht im Zusammenhang mit der Regulation der T‑Zellrezeptor‑abhängigen Aktivierung, der Dynamik der Ca2+-Signalgebung und nachgeschalteten Transkriptionsprogrammen, die Proliferation, Zytokinantworten und Überleben prägen. Über diese Funktionen trägt es zur Kontrolle von Apoptose und zellulären Stressantworten bei und ist in Signalwege eingebunden, die die Immunhomöostase und Entzündung beeinflussen. Eine veränderte STK17B-Aktivität oder -Expression wurde mit Immunfehlregulation und entzündlichen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien in der Leukozytenbiologie macht.

Das DRAK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des STK17B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des STK17B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von STK17B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die DRAK2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von STK17B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der DRAK2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf STK17B-Exone abzielen, die für die DRAK2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere STK17B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom DRAK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom DRAK2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des STK17B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das DRAK2 HDR-Plasmid (h) und DRAK2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von STK17B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten STK17B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.