Plasmide Double Nickase (h) DNAH9: sc-407035-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DNAH9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DNAH9 Double Nickase (h) et le plasmide DNAH9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DNAH9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DNAH9 | sc-407035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DNAH9 | sc-407035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNAH9 code la chaîne lourde 9 de la dynéine axonémale, un grand moteur des microtubules dépendant de l’ATP qui contribue au bras externe de dynéine et génère les forces de flexion des cils. Grâce à des interactions dynéine–microtubule finement régulées, DNAH9 soutient la fonction des cils mobiles et des flagelles, à la base de la clairance mucociliaire et d’autres processus d’écoulement de fluides dépendants des cils. Une activité altérée de DNAH9 a été associée à des phénotypes de ciliopathie motile, notamment des défauts de latéralité et un dysfonctionnement des voies respiratoires, compatibles avec la biologie liée à la dyskinésie ciliaire primitive. En tant que moteur ciliaire offrant de nombreux paramètres de lecture, DNAH9 est largement étudié dans les voies qui régissent l’assemblage axonémal, la fréquence de battement ciliaire et la transduction mécanicochimique de l’énergie.
DNAH9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DNAH9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DNAH9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DNAH9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DNAH9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.