Plasmide Double Nickase (h) DNAH11: sc-404143-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DNAH11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DNAH11 Double Nickase (h) et le plasmide DNAH11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DNAH11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DNAH11 | sc-404143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DNAH11 | sc-404143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNAH11 code une chaîne lourde de dynéine axonémale qui fournit l’énergie nécessaire au glissement des microtubules dépendant de l’ATP au sein des cils motiles, assurant un battement ciliaire coordonné et une clairance mucociliaire efficace. En tant que composant central du bras externe de dynéine, DNAH11 s’intègre à l’architecture de l’axonème et régule l’écoulement des fluides généré par les cils ainsi que l’établissement de l’asymétrie gauche–droite du corps au cours du développement. L’altération de la fonction de DNAH11 est fortement associée à la dyskinésie ciliaire primitive et à des anomalies de latéralité, reliant une activité motrice de la dynéine déficiente à des phénotypes de maladies chroniques des voies respiratoires et à des dysfonctionnements reproductifs. DNAH11 est donc largement étudié dans les contextes de la ciliogenèse, du transport et de l’assemblage axonémaux, ainsi que des voies de signalisation influencées par la motilité ciliaire.
DNAH11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DNAH11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DNAH11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DNAH11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DNAH11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.