Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DMBT1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402615-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DMBT1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DMBT1 Double-Nickase-Plasmid (h) und DMBT1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DMBT1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: DMBT1: sc-514566
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DMBT1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DMBT1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DMBT1 (deleted in malignant brain tumors 1) kodiert ein sekretiertes, multidomäniges „scavenger receptor cysteine-rich“ (SRCR)-Glykoprotein, das an der epithelialen Wirtsabwehr und der mukosalen Homöostase beteiligt ist. Das Protein wirkt bei der Mustererkennung, der Agglutination von Mikroben und der Modulation inflammatorischer Signalwege mit; zudem wurden Funktionen in der epithelialen Differenzierung und in barriereassoziierten Prozessen beschrieben. Die DMBT1-Expression wird als Reaktion auf Gewebeschädigung und immunologische Stimuli reguliert und mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die die angeborene Immunität, Interaktionen mit der extrazellulären Matrix und Zell-Zell-Adhäsion betreffen. Eine veränderte DMBT1-Expression oder ein genomischer Verlust wurde mit unterschiedlichen epithelialen Pathologien sowie Tumorbiologie assoziiert, was DMBT1 als Forschungsziel für Mechanismen von Entzündung, Infektionsbiologie und Krebs unterstützt.
DMBT1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DMBT1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DMBT1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DMBT1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DMBT1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.