Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) DJ-1: sc-401006-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DJ-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DJ-1 Double Nickase (h) et le plasmide DJ-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PARK7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DJ-1 Antibody (D-4): sc-55572
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DJ-1 | sc-401006-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DJ-1 | sc-401006-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PARK7 code DJ-1, une protéine cytoprotectrice multifonctionnelle qui agit comme capteur sensible à l’état rédox et comme modulateur des réponses au stress oxydatif. DJ-1 participe à l’homéostasie mitochondriale, à la protéostase et à la régulation transcriptionnelle, avec des liens rapportés avec la signalisation PI3K/AKT, une activité de type chaperon et la régulation de la gestion des espèces réactives de l’oxygène. Dans les systèmes neuronaux et non neuronaux, DJ-1 influence la susceptibilité au stress oxydatif et métabolique, reliant la biologie de PARK7 à des voies impliquées dans la neurodégénérescence et l’adaptation cellulaire au stress. Une fonction ou une expression altérée de PARK7/DJ-1 a été associée à des mécanismes liés à la maladie de Parkinson et, plus largement, à des contextes où le dysfonctionnement mitochondrial et le déséquilibre rédox conditionnent la survie cellulaire.
DJ-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PARK7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PARK7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PARK7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PARK7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.