DIP2C Double Nickase Plasmid (h): sc-411642-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das DIP2C Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- DIP2C Double-Nickase-Plasmid (h) und DIP2C Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DIP2C abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
DIP2C Double Nickase Plasmid (h) | sc-411642-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DIP2C Double Nickase Plasmid (h2) | sc-411642-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DIP2C (Disco-Interacting Protein 2 Homolog C) kodiert ein nukleäres Protein, das an der chromatinassoziierten Regulation der Genexpression und an Programmen der zellulären Differenzierung beteiligt ist. Berichte aus funktionellen Studien bringen Proteine der DIP2-Familie mit DNA-methylierungsassoziierten Prozessen und Signalwegen der neuronalen Entwicklung in Verbindung, was auf eine Rolle bei der Aufrechterhaltung von Transkriptionszuständen während Entscheidungen über das Zellschicksal hindeutet. Veränderte DIP2C-Expression und genomische Veränderungen wurden in mehreren Tumordatensätzen beobachtet, was die Untersuchung des Gens im Kontext der Krebsbiologie, der Genomstabilität und epigenetischer Dysregulation unterstützt. Entsprechend wird DIP2C häufig in Modellen zur Kontrolle der Proliferation, zur Festlegung der Zelllinie (Lineage Commitment) und zum Umbau transkriptioneller Netzwerke untersucht.
DIP2C Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DIP2C-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DIP2C abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DIP2C-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DIP2C-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.