Plasmide Double Nickase (h) DDX28: sc-412609-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DDX28 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DDX28 Double Nickase (h) et le plasmide DDX28 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DDX28. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DDX28 | sc-412609-NIC | 20 µg | $410.00 |
DDX28 code une hélicase ARN de type DEAD-box localisée dans la mitochondrie, impliquée dans le métabolisme de l’ARN et le remodelage des ribonucléoprotéines au sein du compartiment mitochondrial. Elle est associée à la régulation de l’expression génique mitochondriale, notamment au traitement et à la traduction des transcrits mitochondriaux qui soutiennent la phosphorylation oxydative et le fonctionnement de la chaîne respiratoire. Par ses effets sur l’homéostasie mitochondriale, DDX28 s’inscrit à l’interface du métabolisme énergétique cellulaire et des voies d’adaptation au stress. Une régulation altérée des ARN mitochondriaux et un déséquilibre bioénergétique sont des caractéristiques récurrentes dans divers contextes pathologiques, ce qui fait de DDX28 une cible utile pour des études mécanistiques du dysfonctionnement mitochondrial.
DDX28 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DDX28 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DDX28. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DDX28. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DDX28.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.