Plasmide Double Nickase (h) Dcun1D1: sc-405179-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Dcun1D1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dcun1D1 Double Nickase (h) et le plasmide Dcun1D1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DCUN1D1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Dcun1D1 Antibody (3E1): sc-81835
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Dcun1D1 | sc-405179-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Dcun1D1 | sc-405179-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCUN1D1 code pour Dcun1D1, un facteur accessoire des ligases E3 ubiquitine de type cullin-RING qui favorise la neddylation des protéines cullines et renforce ainsi la protéostasie dépendante de l’ubiquitine. En régulant l’activation des cullines, Dcun1D1 influence la progression du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et le renouvellement dépendant des signaux de protéines régulatrices clés. Une expression altérée ou une amplification de DCUN1D1 a été associée à des programmes de croissance déréglés et a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux, ce qui soutient son utilisation comme nœud moléculaire pour étudier les voies oncogéniques de modification de type ubiquitine. Les recherches sur DCUN1D1 aident à préciser comment la conjugaison de NEDD8 s’articule avec l’ubiquitination pour contrôler la stabilité des protéines et la fitness cellulaire en situation de stress.
Dcun1D1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DCUN1D1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DCUN1D1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DCUN1D1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DCUN1D1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.