Plasmide Double Nickase (h) DABP: sc-405222-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DABP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DABP Double Nickase (h) et le plasmide DABP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DBP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DABP Antibody (H-6): sc-390146
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DABP | sc-405222-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DABP | sc-405222-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DBP code la protéine de liaison au promoteur de l’albumine au niveau du site D (DABP), un facteur de transcription PAR bZIP qui se fixe sur des éléments D-box afin de coordonner les programmes transcriptionnels circadiens. Dans les cellules humaines, DABP participe à la régulation, contrôlée par l’horloge, de réseaux de gènes impliqués dans le métabolisme et la détoxification, et s’interface avec les oscillateurs transcriptionnels via des interactions avec les régulateurs circadiens centraux. Les rythmes dépendants de DBP influencent l’expression génique hépatique, la signalisation hormonale et le métabolisme des xénobiotiques, reliant ce facteur à l’homéostasie systémique. Une expression altérée de DBP ou un désalignement circadien a été associé à une dérégulation des voies métaboliques et à des états inflammatoires, ce qui en fait un point d’entrée moléculaire pertinent pour étudier des phénotypes liés à l’horloge dans des modèles pertinents pour les maladies.
DABP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DBP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DBP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DBP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DBP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.