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cytoglobin Lentiviral Activation Particles (h) | sc-402949-LAC | 200 µl | $455.00 |
Humanes **CYGB** kodiert **Cytoglobin**, ein hexakoordiniertes Globin, das in mehreren Geweben exprimiert wird, Sauerstoff und Stickstoffmonoxid bindet und zur Redoxbalance beiträgt. Cytoglobin ist an zellulären Antworten auf Hypoxie und oxidativen Stress beteiligt, indem es den Umgang mit reaktiven Sauerstoffspezies und die Bioverfügbarkeit von Stickstoffmonoxid moduliert und dadurch die Mitochondrienfunktion sowie stressadaptive transkriptionelle Programme beeinflusst. Veränderte **CYGB**-Expression wurde im Zusammenhang mit Gewebeumbau und Fibrose, vaskulärer Dysfunktion sowie Tumorbiologie beschrieben; dabei wurde Cytoglobin mit Veränderungen des zellulären Überlebens, des Stoffwechsels und der extrazellulären Matrix-Signalgebung in Verbindung gebracht. Diese Eigenschaften machen **CYGB** zu einem nützlichen Ziel, um Sauerstoffsensorik, redoxregulierte Signalwege und Stressantworten in physiologisch relevanten Zellmodellen zu untersuchen.
cytoglobin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CYGB-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.
cytoglobin Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CYGB-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen cytoglobin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CYGB-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.
Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.