CYP19 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400604-LAC

Das humane Gen CYP19A1 kodiert die Aromatase (CYP19), ein Cytochrom‑P450‑Enzym des endoplasmatischen Retikulums, das den letzten Schritt der Östrogenbiosynthese katalysiert, indem es Androgene in Östrogene umwandelt. Durch die Kontrolle der lokalen und systemischen Estradiolproduktion moduliert CYP19A1 Signalnetzwerke von Steroidhormonen, die die Reproduktionsbiologie, die Funktion des Fettgewebes, die Knochenhomöostase und die neuroendokrine Regulation beeinflussen. Seine Aktivität ist in steroidogene Signalwege und Rückkopplungsregulation entlang der Hypothalamus‑Hypophysen‑Gonaden‑Achse eingebunden und prägt transkriptionelle Programme, die über Östrogenrezeptoren vermittelt werden. Eine fehlregulierte CYP19A1-Expression oder Aromataseaktivität wird mit hormonabhängigen Phänotypen in Verbindung gebracht und häufig in Kontexten wie der Tumorbiologie von Brust- und Endometriumgewebe, dem polyzystischen Ovarialsyndrom sowie Aromatase‑Überschuss‑ oder ‑Mangelsyndromen untersucht.

CYP19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CYP19A1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CYP19 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CYP19A1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CYP19-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CYP19A1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.