CUZD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421190

Descripción general

Cuzd1 codifica CUZD1, una proteína con dominios tipo CUB y tipo zona pelúcida implicada en la biología de las células epiteliales y la función de las glándulas secretoras, con funciones descritas en el procesamiento de proteínas y la secreción regulada. En tejidos de ratón, la expresión de CUZD1 está enriquecida en epitelios glandulares y se ha relacionado con vías que controlan la diferenciación celular, la remodelación tisular y las respuestas a señales inflamatorias. La alteración de la regulación de CUZD1 se ha asociado con cambios en la homeostasis epitelial y en programas proliferativos, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de tejidos de barrera y de la fisiología de órganos exocrinos. Como modulador dependiente del contexto del estado celular, CUZD1 ofrece un punto de entrada para diseccionar redes génicas que acoplan la función secretora con la señalización de crecimiento y de estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cuzd1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cuzd1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cuzd1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CUZD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cuzd1 para la investigación de la señalización de CUZD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cuzd1 críticos para la función de CUZD1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cuzd1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido CUZD1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CUZD1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cuzd1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CUZD1 (m) y el plásmido HDR CUZD1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cuzd1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cuzd1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.