Plasmide Double Nickase (h) CRP2: sc-409601-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CRP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CRP2 Double Nickase (h) et le plasmide CRP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CSRP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CRP2 | sc-409601-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CRP2 | sc-409601-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSRP2 code la protéine 2 riche en cystéine et en glycine (CRP2), un régulateur de liaison à l’actine contenant un domaine LIM, fortement exprimé dans les cellules musculaires lisses et les cellules vasculaires. CRP2 se localise au cytosquelette et au noyau, où elle coordonne la dynamique de l’actine avec des programmes transcriptionnels qui façonnent l’adhésion, la migration et la différenciation cellulaires. Elle participe au remodelage du cytosquelette et aux voies de mécanotransduction, en influençant l’expression génique via des interactions avec des partenaires à domaine LIM et des co‑régulateurs transcriptionnels. Des altérations de l’expression de CSRP2/CRP2 ont été rapportées dans divers contextes impliquant le remodelage vasculaire, le comportement des myofibroblastes associé à la fibrose et la motilité des cellules tumorales, ce qui soutient l’intérêt de son étude lors de transitions d’états cellulaires pertinentes pour les maladies.
CRP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CSRP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CSRP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CSRP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CSRP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.