Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRP Double Nickase Plasmid (h): sc-401767-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CRP Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CRP Double-Nickase-Plasmid (h) und CRP Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CRP abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CRP: sc-69770
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CRP Double Nickase Plasmid (h) | sc-401767-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRP Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401767-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C-reaktives Protein (CRP) ist ein Mustererkennungsmolekül aus der Pentraxin-Familie, das überwiegend von Hepatozyten als Antwort auf proinflammatorische Zytokine, insbesondere IL-6, gebildet wird und als wichtiges Akutphaseprotein im Blut zirkuliert. CRP bindet an Phosphocholin und andere Liganden auf geschädigten Zellen sowie auf mikrobiellen Oberflächen und fördert dadurch die Opsonierung und die Aktivierung der klassischen Komplementkaskade über C1q. Über diese Prozesse der angeborenen Immunabwehr verknüpft CRP inflammatorische Signalgebung mit der komplementvermittelten Elimination und moduliert Interaktionen mit Fcγ-Rezeptoren auf myeloiden Zellen. Genetische Variation und eine fehlregulierte CRP-Expression werden im Kontext systemischer Entzündung sowie kardiometabolischer und autoimmunassoziierter Phänotypen umfassend untersucht, was CRP zu einem zentralen molekularen Marker und Regulator in der Entzündungsbiologie macht.
CRP Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CRP-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CRP abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CRP-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CRP-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.