CRF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400770

개요

코르티코트로핀 방출 호르몬(CRH)은 신경펩타이드인 CRF를 암호화하며, 이는 생리적 스트레스에 대한 내분비·자율신경·행동 반응을 조정하는 시상하부–뇌하수체–부신(HPA) 축의 핵심 조절자입니다. 분비된 CRF는 주로 CRHR1/CRHR2를 통해 신호를 전달하여 Gs–아데닐릴 사이클레이스–cAMP/PKA 경로를 활성화하고, CREB 의존적 전사를 조절하며 ACTH 분비를 포함한 하위 신경내분비 출력에 영향을 미칩니다. 또한 CRH/CRF 활성은 염증 및 대사 신호와도 연계되어 뇌와 말초 조직 전반에서 사이토카인 생성과 에너지 항상성에 영향을 줍니다. CRH 발현 또는 CRF 수용체 신호전달의 이상 조절은 스트레스 관련 신경정신학적 표현형과 염증성·위장관 질환과 연관된 것으로 보고되어, 스트레스–면역 상호작용의 기전을 연구하는 데 중요한 표적이 됩니다.

CRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CRH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CRH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CRH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CRF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CRF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CRH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CRF 기능에 중요한 CRH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CRH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CRH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CRF HDR 플라스미드 (h) 및 CRF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CRH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CRH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.