Plásmido Doble Nickase (h) CRBN: sc-412142-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CRBN consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CRBN (h) y el plásmido de doble nickasa CRBN (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CRBN. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CRBN | sc-412142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CRBN | sc-412142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRBN (cereblón) codifica un receptor de sustratos del complejo ligasa E3 de ubiquitina CRL4^CRBN, que acopla CUL4A/DDB1 a proteínas diana específicas para su ubiquitinación y su posterior degradación en el proteasoma. A través de la regulación de la homeostasis proteica, CRBN influye en la progresión del ciclo celular, los programas de diferenciación y las vías de señalización sensibles al estrés. CRBN también es reconocido por su papel en el reclutamiento de sustratos dependiente de pequeñas moléculas, vinculando la degradación mediada por ubiquitina con procesos biológicos relevantes para la farmacología. Las alteraciones en la expresión o la función de CRBN se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con cambios en la sensibilidad celular a perturbaciones de la proteostasis, lo que respalda su relevancia en modelos mecanísticos de enfermedad.
CRBN El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CRBN en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CRBN. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CRBN. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CRBN alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.