COPB 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-404275-NIC

COPB1은 코토머 복합체 I(COPI)의 핵심 구성 요소인 COPB 소단위를 암호화한다. COPI는 골지체에서 소포체(ER)로의 역행 수송을 매개하는 소포 코트의 중심 성분이며, 골지체 내부 수송도 조절한다. COPB는 화물 선택과 소포 출아 과정에서의 역할을 통해 골지체 구조 유지, ER 항상성, 그리고 분비 경로의 흐름을 뒷받침하며, 접힘 단백질 반응(UPR)과 같은 단백질 항상성 및 스트레스 반응 과정과도 맞닿아 있다. COPI 기능에 이상이 생기면 단백질 분류와 막 역학이 교란되고, 그 결과 세포 생존성과 신호전달에까지 영향을 줄 수 있어 COPB1은 인간 세포에서 소기관 간 소통과 막 수송을 연구하는 데 유용한 지점이 된다. 세포 내 수송 경로의 조절 이상은 증식성 질환 및 신경발달 질환의 기전에 흔히 관여하는 것으로 알려져 있어, COPB1 의존적 수송 표현형에 대한 연구가 동기를 얻고 있다.

COPB 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 COPB1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 COPB1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 COPB1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, COPB1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.