Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
connexin 40 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401031-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- connexin 40O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase connexin 40 (h) e o Plasmídeo Double Nickase connexin 40 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GJA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:connexin 40 Anticorpo (B-3): sc-365107
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
connexin 40 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401031-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
connexin 40 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401031-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GJA5 codifica a conexina 40 (Cx40), uma subunidade de canais de junções comunicantes (gap junctions) que forma condutos intercelulares para acoplamento elétrico e metabólico por meio de conexons na membrana plasmática. Em tecidos humanos, a Cx40 é proeminente no endotélio vascular e no sistema de condução cardíaco, onde sustenta a propagação coordenada de sinais e contribui para a homeostase tecidual. A conexina 40 participa da montagem e renovação (turnover) das junções comunicantes, da comunicação célula–célula e da regulação do tônus vascular e da velocidade de condução. A desregulação da expressão de GJA5 ou da função dos canais de conexina tem sido associada a fenótipos cardiovasculares, incluindo anormalidades da condução atrial e suscetibilidade a arritmias, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de eletrofisiologia e sinalização endotelial.
connexin 40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GJA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GJA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GJA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GJA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.