CLC-6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405938

개요

CLCN6는 세포내 염화물/양성자 교환체인 CLC-6을 암호화하며, CLC-6은 주로 엔도좀 및 리소좀 막에 국재하는 CLC 계열 단백질입니다. CLC-6은 소포 내 이온 항상성에 기여하며, 염화물 수송을 양성자 기울기와 결합함으로써 엔도좀 성숙, 리소좀 산성화, 그리고 단백질 분류와 분해(턴오버)에 영향을 미치는 막 수송 과정의 조절에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 이러한 경로에 이상이 생기면 신경세포 및 상피세포의 생리에 변화가 일어날 수 있으며, 사람을 대상으로 한 연구에서 CLCN6의 유전적 변이는 신경발달 관련 표현형 및 보다 광범위한 리소좀 관련 기능 이상과 연관된 것으로 보고되었습니다. 따라서 CLCN6는 엔도리소좀 생물학, 화물 재활용, 그리고 소기관 pH 및 이온 균형 변화와 연계된 세포 스트레스 반응의 맥락에서 흔히 연구됩니다.

CLC-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLCN6 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLCN6 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLCN6의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLC-6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLC-6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLCN6 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLC-6 기능에 중요한 CLCN6 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLCN6 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLC-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CLC-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLCN6 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLC-6 HDR 플라스미드 (h) 및 CLC-6 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLCN6 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLCN6 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.