CKR-7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419708
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CKR-7 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CKR-7, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CKR-7 Anticuerpo (ELC-Fc): sc-23936
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CKR-7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419708 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ccr7 codifica el receptor de quimiocinas CKR-7 (CCR7), un GPCR que se une a CCL19 y CCL21 para dirigir la quimiotaxis y proporcionar señales posicionales a células T, células B y células dendríticas. La señalización de CCR7 activa vías dependientes de Gαi que influyen en la remodelación de la actina, la activación de integrinas y la señalización MAPK/PI3K, lo que favorece el tráfico de leucocitos a través del endotelio linfático y de los órganos linfoides secundarios. En ratones, Ccr7 es esencial para la vigilancia inmunitaria, la organización del tejido linfoide y la migración regulada de células inmunitarias durante la inflamación. El tráfico alterado dependiente de CCR7 se estudia con frecuencia en modelos de autoinmunidad, inflamación crónica y microambientes inmunitarios tumorales, donde los cambios en el homing celular pueden influir en la progresión de la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CKR-7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ccr7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ccr7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ccr7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CKR-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ccr7 para la investigación de la señalización de CKR-7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ccr7 críticos para la función de CKR-7
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ccr7 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CKR-7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido CKR-7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ccr7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CKR-7 (m) y el plásmido HDR CKR-7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ccr7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ccr7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.