CHDH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432328

개요

Chdh는 콜린 탈수소효소(CHDH)를 암호화하며, CHDH는 미토콘드리아 내막에 존재하는 효소로 콜린을 베타인 알데하이드로 산화하는 반응을 촉매하여 이후 베타인 생성과 1-탄소 대사를 지원합니다. 메틸 공여체의 가용성과 오스몰라이트 균형과의 연계를 통해 CHDH는 인지질 항상성, 미토콘드리아 생물에너지 대사, 그리고 대사적·산화적 스트레스에 대한 세포 반응에 영향을 미칩니다. 마우스에서 콜린 산화 과정이 교란되면 간의 지질 처리와 전신 에너지 균형에 영향을 줄 수 있어, CHDH 관련 경로가 지방간 및 관련 심장대사 위험 형질과 연관된 대사 표현형과 연결됨을 시사합니다. 이러한 기능들로 인해 CHDH는 포유류 생리에서 미토콘드리아 대사, 메틸화 의존적 조절, 그리고 영양소–유전자 상호작용을 연구하는 데 유용한 표적(노드)입니다.

CHDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Chdh 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Chdh 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Chdh의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CHDH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CHDH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Chdh 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CHDH 기능에 중요한 Chdh 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Chdh 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CHDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CHDH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Chdh 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CHDH HDR 플라스미드 (m) 및 CHDH HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Chdh 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Chdh 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.