CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-435822-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CHD7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CHD7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CHD7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Chd7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CHD7 Anticorpo (F-11): sc-390742
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-435822-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHD7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-435822-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chd7 codifica a CHD7, um remodelador de cromatina dependente de ATP da família CHD, que regula a acessibilidade de enhancers e programas transcricionais durante o desenvolvimento embrionário e a padronização dos tecidos. Em células de camundongo, a CHD7 influencia a especificação de linhagens e as decisões de destino celular ao coordenar o posicionamento de nucleossomos com a ligação de fatores de transcrição em vias que controlam a crista neural, a neurogênese e o desenvolvimento de órgãos sensoriais. Alterações na função de CHD7 desorganizam a arquitetura da cromatina e redes de expressão gênica, tornando-a um modelo amplamente utilizado para estudar síndromes do desenvolvimento e mecanismos de fenótipos congênitos. A CHD7 também se conecta a processos mais amplos de regulação epigenética, incluindo a comunicação entre promotor e enhancer e o controle do alongamento transcricional.
CHD7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Chd7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Chd7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Chd7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Chd7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.