Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CEP55 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417522
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CEP55 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CEP55, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CEP55 Anticuerpo (B-8): sc-374051
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CEP55 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417522 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CEP55 (proteína centrosomal 55) es un regulador de la citocinesis que se localiza en los centrosomas y en el cuerpo medio (midbody), donde favorece la abscisión coordinando el reclutamiento de la maquinaria ESCRT durante la mitosis tardía. Mediante interacciones con proteínas de andamiaje del cuerpo medio y factores de remodelado de membrana, CEP55 ayuda a mantener una división celular fiel, la estabilidad del genoma y la correcta finalización del ciclo celular. La expresión desregulada de CEP55 se ha vinculado a fenotipos proliferativos e inestabilidad cromosómica observados en múltiples contextos de cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar el control mitótico. CEP55 también es relevante en vías que gobiernan la dinámica del centrosoma, la organización del huso mitótico y las respuestas de los puntos de control ante fallos de citocinesis.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CEP55 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CEP55 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CEP55 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CEP55 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CEP55.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CEP55 para la investigación de la señalización de CEP55, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CEP55 críticos para la función de CEP55
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CEP55 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CEP55 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CEP55 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CEP55. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CEP55 (h) y el plásmido HDR CEP55 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CEP55 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CEP55 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.