Cdc7 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419586

개요

Cdc7(세포 분열 주기 7)은 DNA 복제 개시의 핵심 조절자인 DDK 복합체에서 촉매 소단위로 기능하는 세린/트레오닌 키나아제를 암호화합니다. Cdc7은 MCM 헬리케이스 구성요소를 인산화하여 복제 기점(origin) 발화를 촉진하고, 복제 스트레스 경로에서 오는 신호를 통합하면서 체크포인트 조절과 S기 진행을 조율합니다. 유전체 복제와 복제 포크 안정성에서의 역할을 통해 Cdc7 활성은 증식성 조직에서 염색체 무결성과 세포주기 역학에 영향을 미칩니다. 조절이상 Cdc7 신호전달은 비정상적 증식 및 유전체 불안정성 표현형과 연관되어 있으며, 이는 암 생물학 및 DNA 손상 반응 연구에서 자주 다루어집니다.

Cdc7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cdc7 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cdc7 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cdc7의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Cdc7 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Cdc7 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cdc7 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Cdc7 기능에 중요한 Cdc7 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cdc7 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Cdc7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Cdc7 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cdc7 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Cdc7 HDR 플라스미드 (m) 및 Cdc7 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cdc7 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cdc7 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.