Cdc37 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401574-LAC

CDC37 kodiert Cdc37, einen Ko-Chaperon, der mit HSP90 zusammenarbeitet, um ein breites Spektrum an Proteinkinasen zu stabilisieren und zu reifen. Dabei unterstützt Cdc37 die korrekte Faltung der Kinasen, den Zusammenbau von Proteinkomplexen und schützt sie vor dem proteasomalen Abbau. Über dieses Chaperon‑Klient‑Netzwerk beeinflusst Cdc37 zentrale Signalwege wie MAPK/ERK, PI3K–AKT und die Zellzyklusregulation und prägt damit phosphorylierungsgetriebene Antworten auf Stress- und Wachstumssignale. Veränderte CDC37-Expression oder -Funktion wird mit einer gestörten Kinase-Homöostase und Signalungleichgewichten in mehreren Krebsarten sowie in anderen, von Kinasen abhängigen Krankheitskontexten in Verbindung gebracht. Als zentraler Knotenpunkt der Proteostase wird CDC37 häufig hinsichtlich seines Einflusses auf die Robustheit der Signalübertragung, die zelluläre Fitness und die Anpassung an proteotoxischen Stress untersucht.

Cdc37 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CDC37-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Cdc37 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CDC37-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Cdc37-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CDC37-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.