CD84 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-416482

Übersicht

CD84 ist ein Rezeptor aus der SLAM-Familie innerhalb der Immunglobulin-Superfamilie und wird überwiegend auf Immunzellen exprimiert. Dort ist er an homophiler Adhäsion und kostimulatorischer Signalübertragung beteiligt, die die Aktivierung von Lymphozyten sowie die interzelluläre Kommunikation prägt. Über Assoziationen mit Adapterproteinen wie SH2D1A/SAP und nachgeschalteten Kinasen beeinflusst CD84 Signalereignisse, die mit der Bildung der Immunsynapse, Zytokinantworten und der Regulation von B‑Zell‑ und T‑Zell‑Interaktionen verknüpft sind. Eine veränderte CD84-Expression oder -Signalgebung wurde im Kontext von Immunfehlregulation beschrieben, unter anderem bei entzündlichen Zuständen und bei immunologischen Phänotypen im Zusammenhang mit hämatologischen Malignomen. Als oberflächenständiger immunregulatorischer Knotenpunkt wird CD84 häufig in Signalwegen untersucht, die die Aktivierung und Differenzierung von Leukozyten sowie kontaktabhängige Zell‑Zell‑Signalgebung steuern.

Das CD84 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CD84-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CD84-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CD84 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD84-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CD84-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD84-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CD84-Exone abzielen, die für die CD84-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CD84-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD84 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD84 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CD84-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD84 HDR-Plasmid (h) und CD84 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CD84-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CD84-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.