CD163 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400435

Übersicht

CD163 kodiert einen in Makrophagen und Monozyten angereicherten Scavenger-Rezeptor, der Hämoglobin–Haptoglobin-Komplexe bindet und deren endozytotische Clearance unterstützt, wodurch der Hämstoffwechsel mit antioxidativen sowie eisenverarbeitenden Programmen verknüpft wird. Als Marker alternativ aktivierter (M2-ähnlicher) myeloischer Zustände ist CD163 an immunregulatorischen Signalnetzwerken beteiligt, die das Zytokingleichgewicht, Gewebeumbau und die Auflösung von Entzündungen mitbestimmen. Die CD163-Aktivität steht in Zusammenhang mit Prozessen der angeborenen Immunität, darunter scavengerrezeptorvermittelte Aufnahme, lysosomaler Transport und Crosstalk mit TLR-abhängigen Entzündungssignalwegen. Veränderte CD163-Expression auf tumorassoziierten Makrophagen und bei chronisch-entzündlichen Erkrankungen bietet eine gut nutzbare Achse zur Untersuchung myeloischer Polarisierung, Immunsuppression und mikroumgebungsbezogenem Remodeling in Modellen menschlicher Erkrankungen.

Das CD163 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CD163-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CD163-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CD163 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD163-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CD163-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD163-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CD163-Exone abzielen, die für die CD163-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CD163-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD163 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD163 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CD163-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD163 HDR-Plasmid (h) und CD163 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CD163-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CD163-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.