CCDC25 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408656-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCDC25O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CCDC25 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CCDC25 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCDC25. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CCDC25 Anticorpo (F-7): sc-515201
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCDC25 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408656-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CCDC25 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-408656-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CCDC25 humano codifica uma proteína que contém um domínio coiled-coil e que se acredita contribuir para a formação de “andaimes” de interações proteína–proteína e para a organização espacial de complexos de sinalização ou estruturais. Proteínas coiled-coil frequentemente participam da regulação do citoesqueleto, do tráfego associado a membranas e da coordenação da polaridade celular, sugerindo que o CCDC25 pode influenciar a arquitetura celular e o remodelamento dinâmico. A expressão alterada ou a perturbação de componentes de redes coiled-coil tem sido associada a proliferação, migração e respostas ao estresse desreguladas, tornando o CCDC25 um alvo relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em fisiopatologias relacionadas. Investigar a função do CCDC25 pode ajudar a esclarecer como assembleias mediadas por coiled-coil integram vias de sinalização e estruturais que moldam o comportamento celular.
CCDC25 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCDC25 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCDC25. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCDC25. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCDC25 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.