Plásmido Doble Nickase (h) CBX8: sc-407903-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CBX8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CBX8 (h) y el plásmido de doble nickasa CBX8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CBX8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CBX8 Anticuerpo (C-3): sc-374332
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CBX8 | sc-407903-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) CBX8 | sc-407903-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBX8 (chromobox 8) es una proteína del grupo Polycomb que actúa como lectora de cromatina dentro del complejo represor Polycomb 1 (PRC1) canónico, al reconocer marcas histónicas represivas y ayudar a mantener programas de silenciamiento transcripcional. Mediante la compactación de la cromatina mediada por PRC1 y la regulación de la ubiquitinación de histonas, CBX8 contribuye al control estable de genes del desarrollo, de la identidad celular y de estados transcripcionales ligados al ciclo celular. La actividad desregulada de CBX8 se ha asociado con paisajes epigenéticos alterados que influyen en la proliferación, la diferenciación y vías relacionadas con la senescencia en múltiples contextos de enfermedad. Su papel en la represión transcripcional convierte a CBX8 en una diana útil para investigar cómo la regulación de la cromatina dependiente de Polycomb da forma a las redes génicas.
CBX8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CBX8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CBX8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CBX8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CBX8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.