Cbl Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400561-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CblO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cbl (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cbl (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CBL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cbl Anticorpo (A-9): sc-1651
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cbl Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400561-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cbl Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400561-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CBL codifica a Cbl, uma ligase de ubiquitina E3 e proteína adaptadora que coordena a redução da atividade de tirosina-quinases receptoras e não receptoras ativadas. Por meio do seu domínio TKB e da atividade de ubiquitinação dependente do domínio RING finger, a Cbl promove o tráfego e a degradação de complexos de sinalização mediadas por ubiquitina, modulando as respostas de vias como EGFR/RTK, MAPK/ERK, PI3K–AKT e a sinalização de receptores imunes. A Cbl também contribui para a endocitose, o controle de qualidade de proteínas e a regulação por feedback da intensidade e da duração da transdução de sinal. A desregulação ou mutação de CBL está associada à sinalização aberrante de tirosina-quinases e à biologia de doenças hematológicas, tornando-o um ponto útil para investigar redes de sinalização oncogênica e circuitos regulatórios de células imunes.
Cbl O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CBL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CBL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CBL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CBL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.